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本文標題："冷凍管解凍及培養(yǎng)基回溫的溫度須配合細胞適合生長的溫度"

活化培養(yǎng)的程序

打開水浴槽，確認溫度

將冷凍管以水浴快速解凍(1~2分鐘)，且
必須完全解凍(避免細胞內冰晶反覆形成)

立 刻 將 解 凍 后 的 細 胞 液 加 至 flask(dish)
中，然后緩慢加入新鮮培養(yǎng)基(避免滲透
壓差傷害)

置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)，隔日再離心更換新鮮
培養(yǎng)基(避免剛解凍后的細胞受到離心之
物理傷害)

活化培養(yǎng)常見問題

1. 冷凍管解凍不完全。

2. 未避免滲透壓差傷害。

3. 解凍完馬上離心。(解凍完后的細胞生長勢弱，離心
使得細胞傷害更大，造成生長勢無法回復。)

96.7.1~97.7.31期間 該類反應占總反應之35%

活化培養(yǎng)常見問題

冷凍管解凍及培養(yǎng)基回溫的溫度須配合細胞適合生長的溫度，
否則細胞容易生長不佳。曾發(fā)生以下桉例:

1. SF9昆蟲細胞適合生長于低溫(28 ℃)環(huán)境，然而客戶解凍
該細胞時卻以37℃水溫解凍，結果日后生長狀況不佳。
2. 客戶將細胞冷凍管置于56℃水浴下解凍。
3. 冷藏于4℃下之培養(yǎng)基未加以回溫即進行培養(yǎng)。

培養(yǎng)基相關問題

Q: 細胞培養(yǎng)資料單上建議于培養(yǎng)基中額外添加的Supplement
是否可以乎略？

例如培養(yǎng)基中已含有L-Glutamine(L-Gln)，是否還要添
加？
1. L-Gln 濃度是否到達建議量。
2. 培養(yǎng)基中的L-Gln 容易分解，因此放置過久的培養(yǎng)基
必須再補充至足量的L-Gln。
3. 細胞是否容易受到L-Gln不足而受影響。Raw264.7細胞
容易因L-Gln 不足而分化。