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本文標題："重建三度空間影像上的能力優(yōu)于現(xiàn)有的共軛焦顯微鏡"

重建三度空間影像上的能力優(yōu)于現(xiàn)有的共軛焦顯微鏡
為了解決現(xiàn)存的問題，Bewersdorf的研究團隊針對九種對SNAP-tag及CLIP-tag蛋白質(zhì)具有高親和力并對細胞膜具高通透性的小分子螢光體進行篩選。以兩種螢光染劑ATTO647N及Chromeo-494對HEK293細胞進行細胞膜染色，其STED顯微鏡所得的細胞膜影像厚度分別為78及82nm，遠優(yōu)于共軛焦顯微鏡所得的320及239nm。研究團隊亦利用EGF-CLIP-ATTO647N及 EGFR-SNAP- Chromeo-494的交互作用模型，在受體－配體結(jié)合后，細胞進行內(nèi)噬作用時，同步擷取EGF和EGFR在細胞內(nèi)、外的運動影像，完成了首例STED 顯微鏡的活細胞連續(xù)雙色螢光套色影像處理。

在STED顯微鏡系統(tǒng)方面，Bewersdorf的研究團隊應(yīng)用自行開發(fā)的系統(tǒng)，此一系統(tǒng)在重建三度空間影像上的能力優(yōu)于現(xiàn)有的共軛焦顯微鏡，可以進行小于100nm厚度的?切掃瞄。這項技術(shù)的發(fā)展，對于追?奈米微粒在細胞內(nèi)的分佈大有助益，過去一些無法以傳統(tǒng)光學(xué)顯鏡觀察到的細胞內(nèi)微小胞器的生理反應(yīng)現(xiàn)像，在新的STED顯微鏡系統(tǒng)下將一一現(xiàn)形。研發(fā)團隊已為此STED顯微鏡系統(tǒng)申請專利