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本文標題:"血球分離!利用離心法分離出成分進一步觀察血球細胞"

新聞來源:未知 發(fā)布時間:2012-2-12 0:44:46 本站主頁地址:http://www.nhgjxq.cn

血液中血球之分離
目的  「分類」為人類認識大自然生物最基本的法則,想要瞭解人體生命運作的奧秘,必須先對細胞做型態(tài)及功能上的做分類,這些看似簡單的想法,卻是往后探究生命活動的基礎。此實驗是以血液這個「溷合物」為例子,利用離心的方法分離出各種成分并進一步觀察血球細胞。
原理  血液像河流一樣,主要是水分,就是血液中液體的部分,稱之為血漿(Plasma)。在這流動的液體中也有一些浮游生物,就是紅血球(Red blood Cells)、白血球 (White blood cells)、和血小板(Platelets)等,它們大小不一,形狀不同,數量也不同。體積以白血球最大、紅血球次之、血小板最。粩盗恳约t血球最多;白血球有核行動有自主性。由于血液細胞依不同種類都有其特定的密度,如:紅血球還有大量的血紅素,而血紅素中又含有鐵,因此在血球細胞中其密度最大,因此利用不同溶液的密度,使細胞在離心的過程中,會分佈在與其密度相同的溶液介面。粒子在離心時,其 分子量、分子密度、組成、形狀 等,均會影響其沉降速率,沉降係數即用來描述此沉降性質;其單位為 S (Svedberg unit),每一種粒子的沉降係數與其分子密度或分子量成正比。 不同沉降係數的粒子可利用離心法在密度梯度中作分離。
材料  血液(5ml):前一天預先抽出,以heparin防止凝血,為各種血球細胞的來源。
設備  懸臂式離心機 (直徑10cm)
離心管 
玻片
藥品  Ficoll-Paque溶液
食鹽水:低張,等張(約0.4%),及高張溶液
步驟  1. 10ml離心管內加入5mlFicoll-Paque溶液,再緩慢的將5ml血液加入離心管。(注意!兩者不能溷合。)
2. 在18℃下,以3000rpm的離心速度,離心30分鐘。
3. 離心后,離心管內會分成不同的溶液層。記下所見到的分層
4. 將各層作成玻片標本觀察,看各種血球的型態(tài)。
5. 吸取紅血球那一層溶液,分別以低張,等張及高張溶液稀釋十倍后滴一滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,以400X觀察紅血球的型態(tài),討論滲透壓對于細胞的影響。
時間  約一個半小時
備注  

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