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自動圖像
顯微鏡測出細菌總數(shù)和平均面積含量數(shù)量
直接測量法
與培養(yǎng)法不同,直接側(cè)定法在側(cè)試過程中不需要SRB生長,而是直接檢測SR B的存在
(包括SRB苗體的存在或SRB細胞所含化合物的存在)。
①顯微鏡直接計數(shù)法一般認為顯微鏡只能測出系統(tǒng)細菌的總數(shù),不能檢出SRB的數(shù)
級。用異硫佩酸鹽熒光素(FITC)和間接熒光抗體
技術(shù)(IFA)可定承檢測細細菌總數(shù)和SRB含盆.它的原理是,F(xiàn)ITC染料可粘附到任何蛋白質(zhì)
上,微生物經(jīng)FITC處理后,在配有熒光的顯微鏡下,將染色細菌放大1 000或1 600倍就可觀
察,側(cè)得細菌總數(shù);而IFA間接熒光抗體只能在SRB上著色,在
熒光顯微鏡上觀察可得到
SRB的數(shù)最.該方法的關(guān)鍵是染色劑的開發(fā),它經(jīng)實驗室制成后,可冷藏保存,使用多年。
顯微鏡計數(shù)最大的特點是快速,但需特定的染料及受過培訓(xùn)的操作人員;由于該技術(shù)不
能分辨細菌的死活,一些死菌體也被計人,故顯微鏡計數(shù)往往偏高。
② ATP法三確酸腺昔(ATP)是所有活的生物細胞中都具有的一種化合物. ATP法通
過側(cè)定水樣中ATP的含盆來檢測水樣中的生物總數(shù)。由于在油田污水注水系統(tǒng)中ATP主要
來自于細苗(包括SRB),因此有人提出ATP法可用于油田污水注水水樣檢測包括SRB在內(nèi)
的細菌總數(shù)。
ATP法的基木方法是,先過濾水樣去除其中的溶解性固體和鹽類(它們可能干擾洲定試
驗),在過濾后的水樣中加人一種試劑(如三經(jīng)甲氨基甲烷)在一定條件下使細胞中的ATP釋
放出來,再加人一種特殊醉(熒光素酶)。這種醉能與ATP作用引起光化學(xué)反應(yīng),該反應(yīng)所
產(chǎn)生的光強是定量的,即每個ATP產(chǎn)生1個光單位。通過光度計測定光強,并查閱標準光強
—菌最關(guān)系曲線,則可得到水樣中的細苗總數(shù)。
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