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植物懸浮培養(yǎng)中被廣泛使用-分析圖像
顯微鏡
在初始和系列繼代繁殖的植物懸浮培養(yǎng)中被廣泛使用的是水平搖床
。搖床的轉速要可以調節(jié)(30—150r/min),擺幅的軌道運動范圍應該
是4—8cm。把培養(yǎng)介質放在搖床上振蕩主要有兩個目的:首先,振蕩能
對細胞聚合體施加輕微的壓力,使其分散為較小的細胞團和單個細胞;
其次,振蕩可以使介質中的細胞和細胞團分布均勻。另外,介質的振蕩
還可以使培養(yǎng)介質和空氣間進行良好的氣體交換。搖床要放置在可以控
制溫度的空調房間里。懸浮培養(yǎng)最常用的器皿是廣口聚乙烯燒瓶,
懸浮培養(yǎng)物的體積要與器皿的體積相稱,大小為lOOmL的燒瓶可以
培養(yǎng)20mL培養(yǎng)物,250mL的燒瓶可以培養(yǎng)70mL培養(yǎng)物。燒瓶通常用鋁箔
封口。封口要求是:保持無菌狀態(tài),能夠與外界進行氣體交換,減少蒸
發(fā)。蒸汽滅菌時燒瓶通常用棉球塞封口,但棉球塞不用于細胞培養(yǎng)過程
中。因為培養(yǎng)時燒瓶要在搖床上放置幾周,棉球塞很可能會成為主要的
污染源。
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