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本文標題："顯微鏡培養(yǎng)箱成像細胞的溫度實驗圖像顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2017-3-14 1:41:44 本站主頁地址：http://www.nhgjxq.cn
顯微鏡培養(yǎng)箱成像細胞的溫度實驗圖像顯微鏡
用括號中的任一儀器保持成像細胞的溫度(例如，完全封閉的顯微
鏡培養(yǎng)箱，循環(huán)水浴溫度控制器，獨立控制的階段加熱器，熱空氣
對流元件)。注意：這些溫度控制元件的效率和價格按照從前到后
依次遞減。3．各種可用的熒光蛋白極大地降低了成像的硬件要求
。使用標準的激發(fā)源和濾過設(shè)備能捕獲很多這些蛋白質(zhì)。4．EGFP
和EYFP，作為最常用的綠色熒光蛋白，能在一定程度上抵抗光漂白
作用，但是在任何試驗中都要考慮這種現(xiàn)象。應(yīng)該盡可能地降低這
些激發(fā)力，以延長熒光標記物的壽命。5．通常盡可能地保持蛋白
質(zhì)的低表達，因為很多哺乳動物表達質(zhì)粒中所用的強啟動子能引起
熒光蛋白過表達的級聯(lián)放大效應(yīng)，并且熒光蛋白的桶狀結(jié)構(gòu)可以使
其較弱[如水母(Aequoreavictoria)突變體]或者較強[如某些珊瑚
和異輻�？�(Disco一50maandHeteractiscrispa)突變體]地自我交
聯(lián)。6．開始實驗時，應(yīng)考慮到整個研究的時間進程。如果實驗進
程很快，成像的間隔時間應(yīng)該很小或為零。在這種情況下，影像掃
描和影像收集也要迅速。由于信噪比會隨所收集的光子數(shù)目的平方
根增加(即掃描時間越長，信噪比越好)，增加幀頻通�？山档托旁�
比。由于進程較慢的研究掃描時間更長，并且有更長的時間間隔，
因此可以減少這些限制。兩種情況均應(yīng)考慮整個激發(fā)時間以減少光
漂白效應(yīng)。7．使用傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)定位目的熒光細胞后，
首先調(diào)節(jié)焦距、激發(fā)水平和探測器的捕獲能力，在較短的時間內(nèi)掃
描細胞，探測器可以從感興趣的焦平面獲取足夠的信號。要盡可能
快地完成這些步驟，以減輕甚至在實驗開始前就開始的光漂白效應(yīng)
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